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神仙道33区飞狐外传:高效液相—蒸发光散射法测定藿胆滴丸中猪去氧胆酸含量

亚博yabo88发布时间:2019-01-09 阅读:

摘 要:本文采用高校液相测定了藿胆滴丸中猪去氧胆酸的含量,固定相为:安捷伦Cl8(4.6mm×250mm,5um),甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸溶液(20∶40∶40)为流动相,ELSD检测器漂移管温度85℃,气体流速:2.5L·min-1,柱温:30℃。猪去氧胆酸在20~350微克/毫升范围内呈良好的线性关系。猪去氧胆酸的平均回收率为99.1%,RSD为0.98%(n=6);此方法简便、准确、重现性好,可用于藿胆滴丸中猪去氧胆酸的含量测定。

关键词:藿胆滴丸;猪去氧胆酸;含量

藿胆滴丸为黄白色的滴丸,由猪胆酸、藿香油、聚乙二醇(6000)組成。藿胆滴丸具有清热化浊,宣通鼻窍的功效,常用于风寒化热,胆火上攻引起的鼻塞欠通,鼻渊头痛。猪胆粉来源本品为猪科动物猪Sus scrofa dommestica Brisson.胆汁的干燥品。猪胆粉具有清热,润燥,解毒,止咳平喘的功效,常用于热病燥渴、痢疾、便秘、喉痹、百日咳、痈疮肿毒等。本文采用高校液相测定了藿胆滴丸中猪去氧胆酸的含量。

1 仪器与试药

VWR天平防震垫(北京慧龙环科环境仪器有限公司);JJ-BF 0.001g天平(上海仁沃实业发展有限公司);YL9100液相色谱仪(汕头市科毅仪器设备有限公司);蒸发光散射检测器(上海通微分析技术有限公司);Milli-Q Direct水纯化系统(上海力晶科学仪器有限公司);DX-208恒温水浴槽(北京长流科学仪器有限公司);美国泽拉布Super超越系列全触屏超纯水系统(上海和泰仪器有限公司);10升数控型超声波清洗器(天津市瑞普电子仪器公司)。猪去氧胆酸对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈(北京市津同乐泰化工产品有限公司)、甲醇(安徽胜达化工科技有限公司)、冰醋酸(北京市津同乐泰化工产品有限公司)、乙醇(北京市津同乐泰化工产品有限公司)、磷酸(上海展云化工有限公司)、三乙胺(北京市津同乐泰化工产品有限公司)、正丁醇(昆山诺普森实验室用品科技有限公司)。

2 含量测定

2.1 色谱条件:依据查阅文献及考查的结果,确定色谱条件如下[1-6]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为(4.6mm×250mm,5um);甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸溶液(20∶40∶40)为流动相,ELSD检测器漂移管温度85℃,气体流速:2.5L·min-1。理论板数按猪去氧胆酸峰计算应不得低于2000。

2.2 供试品溶液的制备

取藿胆滴丸粗粉,精密称取,置索氏提取器中,加甲醇80ml,回流1小时,提取液回收甲醇并浓缩至干,残渣用30毫升纯化水溶解,用二氯甲烷萃取三次,每次30毫升,合并二氯甲烷,水浴蒸干,残渣用甲醇溶液溶解转移至10毫升容量瓶内并分次洗涤容器,洗液滤入同一量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取猪去氧胆酸对照品约5毫克,用流动相溶解并稀释成每1ml中含200微克的溶液,作为对照溶液。

2.4 阴性溶液的制备

取藿香油、聚乙二醇(6000),依上述方法测定,结果在猪去氧胆酸出峰处阴性液无色谱峰,结果阴性试验没有干扰,表明本方法专属性良好。

2.5 准曲线的制备

制备浓度为20微克/毫升、50微克/毫升、100微克/毫升、150微克/毫升、200微克/毫升、250微克/毫升、300微克/毫升、350微克/毫升的对照品溶液,分别精密吸取10μL注入HPLC,记录色谱图。以峰面积积分值A(微克)为横坐标,进样量为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程。试验表明,猪去氧胆酸对照品在20~350微克/毫升范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验

依照2.3项下制备对照品溶液,精密吸取猪去氧胆酸对照品溶液10μL重复进样6次,测定峰面积积分值,对照品峰面积积分值的RSD为0.76%。结果表明,本实验精密度良好。

2.7 重现性试验

称取同一批的藿胆滴丸样品6份,按测定方法项下的方法制备供试品溶液,测定含量,并计算样品的RSD值,结果RSD为0.77%,结果表明此方法的重现性良好。

2.8 回收率试验

采用加样回收试验,取已知含量的同一批供试品各6份,精密称定,分精密添加一定量的猪去氧胆酸对照品,按供试品制备所述方法制备供试品溶液,测定含量(同时测定样品含量),计算回收率。6次测定的平均回收率为99.1%,RSD为0.98%。

2.9 样品含量测定

依照上述含量测定方法,测定藿胆滴丸三批样品中猪去氧胆酸的含量见表1。

3 讨论

分别考察甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸溶液(20∶40∶40),乙腈-0.1%磷酸(50∶50),甲醇-乙腈-水(10∶30∶60),甲醇-水(80:20,含0.1%三乙胺),0.02mol/L磷酸二氢钠∶甲醇(体积比为15∶85)不同比例的流动相,结果以甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸溶液(20∶40∶40)为流动相,供试品各峰分离效果最好,故选用甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸溶液(20∶40∶40)为流动相。此方法简便、准确、重现性好,可用于藿胆滴丸中猪去氧胆酸的含量测定。藿胆滴丸中猪去氧胆酸的含量应为不少于3.5mg/丸。

参考文献

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